Hibridoma Fusió i Selecció Mitjà (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Descripció del producte

产品名称

Nom del producte

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Mitjà de selecció i fusió d'hibridoma (HAT)

货号 Cat.No

BRS-MED01

规格

Especificació

500 ml/瓶

500 ml/ampolla

产品组分

Components

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

Mitjà base DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Sèrum boví fetal importat (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Mitjà condicionat: 10% (v/v)

青霉素: 100 单位/mL

Penicil·lina: 100 U/ml

链霉素:100 单位/mL

Estreptomicina: 100 U/ml

次黄嘌呤 (hipoxantina): 100 uM

Hipoxantina: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(Timidina): 16uM

Timidina: 16 µM

氨基蝶呤(Aminopterina): 0,4 uM

Aminopterina: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Altres additius: Diverses citocines (quantitat suficient) i suplements

保存条件

Condicions d'emmagatzematge

-20 graus 保存,有效期 18 个月.

Emmagatzemar a -20 graus. Vida útil: 18 mesos.

使用方法

Instruccions d'ús

培养基融化:

37 graus 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 minuts使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Descongelació del mitjà:

Descongela el mitjà en un bany maria a 37 graus. Netegeu la superfície exterior amb etanol al 70% i col·loqueu-lo en un armari de bioseguretat per utilitzar-lo.
Nota: l'aparició d'una petita quantitat de material floculent blanc després de la descongelació és normal. Deixeu reposar el medi durant 3-5 minuts perquè els flocs s'assentin a la part inferior i, a continuació, reculli amb cura el sobrenedant per utilitzar-lo.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/坭6) 37 graus 5% CO2 培养箱静置培养.

Fusió cel·lular i sembra:

Realitzar la fusió cel·lular mitjançant mètodes físics (electrofusió) o químics (PEG convencional). Resuspendre les cèl·lules fusionades directament en aquest medi amb una densitat i un volum adequats:

Electrofusió: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ cèl·lules/pou

Fusió PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ cèl·lules/pou
Volum recomanat: 200 µL/pou en una placa de 96 pous.
Incubar a 37 graus, 5% CO₂ per al cultiu.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Substitució mitjà:

Els dies 4 i 8 posteriors a la-fusió, feu una substitució parcial o completa del medi segons l'estat de creixement de les cèl·lules.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Projecció de clons:

Quan els clons cel·lulars dels pous arribin a una mida adequada, realitzeu un cribratge de clons positius.

注意事项

Precaucions

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Aquest producte és tòxic i només està destinat a la selecció i cultiu de cèl·lules d'hibridoma. No s'ha d'utilitzar per al cultiu d'animals vius, fins diagnòstics o aplicacions terapèutiques.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0).

Aquest producte és adequat per a la selecció i cultiu de cèl·lules d'hibridoma mitjançant el sistema de selecció HGPRT. No s'aplica a TK ni a altres sistemes de selecció. Aquest medi no es pot utilitzar per al cultiu directe de cèl·lules deficients d'HGPRT-(per exemple, NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Aquest producte és una solució estèril amb un pH de 7,2-7,4. Tota la manipulació s'ha de realitzar en condicions asèptiques.