Expansió de cèl·lules d'hibridoma i mitjà de subclonació 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Descripció del producte

产品名称

Nom del producte

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Expansió de cèl·lules d'hibridoma i medi de subclonació

货号 Cat.No

BRS-MED02

规格

Especificació

500 ml/瓶

500 ml/ampolla

产品组分

Components

DMEM基础培养基:80%(体积比)

Mitjà base DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Sèrum Boví Fetal (FBS, importat): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Mitjà condicionat: 10% (v/v)

青霉素: 100 单位/mL

Penicil·lina: 100 U/ml

链霉素:100 单位/mL

Estreptomicina: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Altres additius: factors de proliferació-unicel·lulars i suplements de molècules petites

保存条件

Condicions d'emmagatzematge

-20 graus 保存,有效期 18 个月.

Emmagatzemar a -20 graus, vida útil 18 mesos

使用方法

Instruccions d'ús

培养基融化:

37 graus 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Descongelació del mitjà:

Descongela el mitjà en un bany maria a 37 graus. Netegeu la superfície exterior amb etanol al 70% i col·loqueu-lo en un armari de bioseguretat per utilitzar-lo.
Nota: l'aparició d'una petita quantitat de material floculent blanc després de la descongelació és normal. Deixeu reposar el medi durant 3-5 minuts perquè els flocs s'assentin i, a continuació, recolliu el sobrenedant per utilitzar-lo.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基板.铺板.

Manipulació de pous de fusió: cèl·lules sanes:

Per als pous de fusió amb cèl·lules en bon estat (p. ex., color mitjà normal o lleugerament groc, les cèl·lules al microscopi semblen sanes, brillants i de mida normal), pipeteu suaument cap amunt i cap avall amb una punta de pipeta groga. Compteu les cèl·lules i la placa a 0,8-1,5 cèl·lules/pou en 200 µL de medi.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Manipulació de pous de fusió: cèl·lules subòptimes:

Per als pous de fusió amb cèl·lules en condicions subòptimes (p. ex., acidificades mitjanes/grogues o les cèl·lules semblen arrugades, fosques al microscopi), hi ha dues opcions disponibles per a la subclonació posterior:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Opció 1: transfereix les cèl·lules del pou de fusió a una placa de 24 pous que conté 1 ml d'aquest medi. Després de 2-3 dies d'expansió, comptar les cèl·lules i realitzar la subclonació a 0,8-1,5 cèl·lules/pou en 200 µL de medi. En aquesta etapa, la duplicació cel·lular és limitada, però la condició cel·lular és bona, per la qual cosa és ideal per a la subclonació.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培兇基培兇%37 CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5cell/孔/200ul培养基);

Traieu amb cura el sobrenedant del pou de fusió amb una punta de pipeta groga i afegiu 200 µL de medi fresc per pou. Incubar a 37 graus, 5% CO₂ durant 3-4 hores. A continuació, mostreu les cèl·lules, compteu i realitzeu la subclonació a 0,8-1,5 cèl·lules/pou en 200 µL de medi.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Nota: els subclons cultivats amb el medi d'expansió i subclonació de cèl·lules d'hibridoma solen arribar a un estadi adequat per a la detecció o anàlisi aigües avall els dies 6-8 posteriors a la-subclonació.